脫氧核糖核酸酶 I 來源于牛胰腺
Type IV, lyophilized powder, ≥2,000 Kunitz units/mg protein
DNAse I可用于切開DNA,作為將標記堿基插入DNA的第一步。來自sigma的該酶已用于處理大鼠的腦組織。該研究表明星形膠質(zhì)細胞的軸突生長不受少突膠質(zhì)細胞抑制。
[1]在另一項研究中,
大腸桿菌的解凍固定樣本被來自Sigma的DNAseI以及其他酶進行消化。消化是在進行通透化處理和核酸染色前完成的。
[2]來自牛胰腺的脫氧核糖核酸酶I已用于研究枯草芽孢桿菌中核酸酶的二維酶譜分析。來自牛胰腺的脫氧核糖核酸酶I還用于研究小溝和大溝結(jié)合藥物和嵌入劑對小溝結(jié)合蛋白RecA和脫氧核糖核酸酶I的DNA結(jié)合的影響。
用于從蛋白質(zhì)樣品中除去 DNA。
生化/生理作用
DNase I是一種內(nèi)切核酸酶,可作用于與嘧啶相鄰的磷酸二酯鍵以產(chǎn)生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。當(dāng)Mg
2+存在時,DNAse I可獨立切割DNA的每條鏈且切割位點是隨機的。當(dāng)Mn
2+存在時,兩條DNA鏈都幾乎是在同樣的位置被切割。
[3]最適pH在7-8之間。二價陽離子如Mn
2+, Ca
2+, Co
2+以及Zn
2+都是酶的激活劑。
[4]5 mM濃度的Ca
2+可穩(wěn)定酶免收蛋白水解酶的消化。來自牛胰腺的DNAse I由四種色譜可區(qū)分的組分A,B,C和D組成,它們的摩爾比為4:1:1。僅有少量的D被發(fā)現(xiàn)。螯合劑、十二烷基硫酸鈉(SDS)
[6]和肌動蛋白
[7]都已知可抑制酶的活性。
單位定義
一Kunitz單位的酶在以I型或III型DNA作為底物時,在 pH 5.0,37°C的條件下在每mL中每分鐘可引起0.001的A260。
制備說明
溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分裝保存在?20 °C一周后可能會丟失<10%的活性。同樣的溶液保存在2-8 °C則可能丟失約20%的活性。當(dāng)在pH 5和7之間時,它可在60 °C維持活性最長達五小時,并在68 °C <10分鐘內(nèi)丟失活性。它在乙酸緩沖液(pH 5.0)和tris緩沖液((pH 7.2),1 mg/mL濃度)中以6%/小時的速率丟失活性。
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