eBgDy™ Terminator 3.1 循環(huán)測(cè)序試劑盒

eBgDy™ Terminator v3.1 循環(huán)測(cè)序試劑盒用于對(duì) DNA 樣本進(jìn)行桑格測(cè)序。它旨在提供具有高精度和很小噪音的高質(zhì)量測(cè)序數(shù)據(jù)。

eBgDy™ Terminator v3.1 循環(huán)測(cè)序試劑盒可直接替代 Applied Biosystem 的 BigDye™ Terminator v3.1 循環(huán)測(cè)序試劑盒。當(dāng)前 BigDye™ v3.1 用戶可以無縫切換到 eBgDy™ v3.1，而無需更改當(dāng)前協(xié)議。無需安裝新軟件或移動(dòng)轉(zhuǎn)移文件。也不需要新的校準(zhǔn)或驗(yàn)證。

該試劑盒包括 eBgDy™ Terminator v3.1 測(cè)序混合物，其中包含用不同熒光染料標(biāo)記的雙脫氧核苷酸終止子的專有混合物。該混合物還包括 DNA 聚合酶，它將退火的引物延伸到 DNA 模板上，并摻入熒光標(biāo)記的雙脫氧核苷酸終止子，從而導(dǎo)致鏈終止和不同長度 DNA 片段的合成。

測(cè)序反應(yīng)通常在熱循環(huán)儀中進(jìn)行，它使用一系列溫度循環(huán)來控制引物的退火和延伸。反應(yīng)完成后，產(chǎn)物被純化并加載到毛細(xì)管電泳儀器上，例如Applied Biosystems 3730xl DNA分析儀，它按大小分離片段并檢測(cè)熒光信號(hào)。

eBgDy™ Terminator v3.1 循環(huán)測(cè)序試劑盒具有以下功能：

•     高準(zhǔn)確度：該試劑盒提供高質(zhì)量的測(cè)序數(shù)據(jù)，準(zhǔn)確度高，噪音極小，適合廣泛的應(yīng)用，包括從頭測(cè)序、變異檢測(cè)和基因分型。

•     應(yīng)用范圍廣：該試劑盒可用于多種DNA模板的測(cè)序，包括PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒、BAC、fosmid等。

•     易于使用：該試劑盒設(shè)計(jì)易于使用，具有簡(jiǎn)單的反應(yīng)設(shè)置和標(biāo)準(zhǔn)化方案。

與 BigDye™ v3.1 相比，eBgDy™ v3.1 還帶來了許多優(yōu)勢(shì)

• 更快的反應(yīng)周期：eBgDy™ 需要 3 分鐘的延伸時(shí)間，而不是 4 分鐘，如果需要，可以進(jìn)一步縮短至 2 分鐘。

• 更高的稀釋倍數(shù)：只需 0.15 µl 的 eBgDy™ 即可在 5 µl 總體積反應(yīng)中成功使用（圖 1）

• 更高的成功率：特別是對(duì)于困難的模板（圖2）

圖 1 上圖：使用 0.15 µl BigDye™ v3.1 得到的正常模板的原始測(cè)序信號(hào)，一式兩份。下圖：使用 0.15 µl eBgDy™ 得到的相同正常模板的原始測(cè)序信號(hào)?？偡磻?yīng)體積為 5 µl。
 

圖 2 上圖：使用 0.15 µl BigDye™ v3.1 得到的富含 GT 模板的原始測(cè)序信號(hào)，一式兩份。下圖：使用 0.15 µl eBgDy™ 得到相同 GT 豐富模板的原始測(cè)序信號(hào)。總反應(yīng)體積為 5 µl。

上海寶葉生物科技有限公司

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